Avaliação da expressão da filagrina em biópsias esofágicas de pacientes com esofagite eosinofílica / Evaluation of philagrin expression in esophageal biopsies of patients with eosinophilic esophagitis

Introdução: Mutações do gene da filagrina vêm sendo associadas, classicamente, a alterações da barreira epitelial em doenças alérgicas com comprometimento da pele e das superfícies mucosas. Particularmente na dermatite atópica, a relação entre filagrina, mecanismo fisiopatológico e evolução clínica tem sido demonstrada. Recentemente, alterações da barreira epitelial com redução da expressão da filagrina, também têm sido associadas a mecanismos imunológicos envolvidos na patogênese da esofagite eosinofílica. Devido a disfunções na barreira epitelial, microrganismos e alérgenos são capazes de penetrarem no epitélio da mucosa esofágica, assim como na dermatite atópica. Objetivo: Avaliar a possível correlação da expressão da filagrina com os achados histopatológicos em biópsias esofágicas de pacientes com esofagite eosinofílica. Métodos: A expressão da filagrina foi investigada in situ, por imuno-histoquímica, em biópsias esofágicas nos seguintes grupos: Grupo I, controle (n=8), amostras provenientes de pacientes saudáveis; Grupo II (n=27), amostras provenientes de pacientes com esofagite eosinofílica. Resultados: Os resultados demonstraram uma diminuição da expressão da filagrina na mucosa do esôfago de portadores de esofagite eosinofílica. Adicionalmente, a intensidade da marcação imuno-histoquímica foi menor na mucosa esofágica com maior infiltração de eosinófilos. Conclusão: A diminuição da expressão de filagrina pode ser um fenomeno fisiopatológico associado ao aumento da quantidade de eosinófilos na mucosa esofágica, podendo impactar na evolução clínica da esofagite eosinofílica.

Introduction:Filaggrin gene mutations have been classically associated with changes in the epithelial barrier in allergic diseases involving the skin and mucosal surfaces. Particularly in atopic dermatitis, the relationship between filaggrin, pathophysiological mechanism and clinical evolution hás been demonstrated. Recently, changes in the epithelial barrier with reduced expression of filaggrin have also been associated with immunological mechanisms involved in the pathogenesis of eosinophilic esophagitis. Due to dysfunction in the epithelial barrier, microorganisms and allergens are able to penetrate the epithelium of the esophageal mucosa, as well as in atopic dermatitis. Objective: To evaluated the possible correlation of filaggrin expression with histopathological findings in esophageal biopsies of patients with eosinophilic esophagitis. Methods: Filaggrin expression was investigated in situ by immunohistochemistry in esophageal biopsies in the following groups: Group I, control (n = 8), samples from healthy patients; Group II (n = 27), samples from patients with eosinophilic esophagitis. Results: The results demonstrated a decrease in the expression of filaggrin in the esophageal mucosa of patients with eosinophilic esophagitis. Additionally, the intensity of the immunohistochemical labeling was lower in the esophageal mucosa with greater infiltration of eosinophils. Conclusion: The reduction of filaggrin expression may be a pathophysiological phenomenon associated with an increase in the quantity of eosinophils in the esophageal mucosa, which may impact on the clinical evolution of eosinophilic esophagitis.

Quantificação de substâncias do fator de hidratação natural (NMF) do estrato córneo ex vivo em função do fototipo e idade / Ex vivo quantification of natural hydration factor (NMF) substances in the stratum corneum as a function of phototype and age

A hidratação cutânea ocorre, em parte, pelos componentes do Fator de Hidratação Natural (NMF), originados da degradação da filagrina, sendo alguns exemplos o ácido pirrolidona-carboxílico (PCA), o ácido urocânico (UCA) e a histidina (His). Estes estão presentes no estrato córneo (EC). O objetivo deste projeto de pesquisa foi determinar, por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), o PCA, o UCA e a His no estrato córneo de participantes obtido por tape stripping em função do fototipo e idade do participante da pesquisa. Participantes foram selecionados em função da idade acima de 18 anos, ambos os gêneros e fototipo da pele entre I a VI, de acordo com a classificação de Fitzpatrick. As amostras do EC foram obtidas do antebraço volar por tape stripping e irradiadas artificialmente. A cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) foi eficaz para separação e quantificação adequada das substâncias químicas His, PCA e os isômeros de UCA (trans-UCA e cis-UCA) no estrato córneo dos participantes. O método apresentou-se seletivo e ausente de interferentes, ademais, possuiu linearidade e limites de detecção e quantificação compatíveis com os objetivos dessa investigação. No fototipo I, os níveis de His foram menores em comparação aos demais grupos. Ademais, os níveis dessa mesma substância não apresentaram diferença entre as faixas etárias. Em função da irradiação das amostras, o montante de His aumentou em todos os fototipos. Os níveis de PCA apresentaram-se menores após a irradiação em todos os fototipos de pele. Ainda, as concentrações do PCA foram mais elevadas na faixa etária de 46 a 55 anos de idade. Os níveis de concentração do isômero cis-UCA foram maiores nos participantes com fototipo III, após a irradiação UV. Os níveis de concentração do isômero trans-UCA diminuíram após a irradiação, de forma proporcional à formação de cis-UCA em todos os fototipos. A faixa etária de 46-55 anos de idade obteve níveis significativamente menores de trans-UCA e cis-UCA

Cutaneous hydration occurs, in part, by the components of the Natural Hydration Factor (MFN), originating from the degradation of filagrina, some examples being pyrrolidone-carboxylic acid (PCA), urocanic acid (UCA) and histidine (His). These are present in the stratum corneum (SC). The objective of this research project was to determine, by high efficiency liquid chromatography (HPLC), the PCA, UCA and His in the stratum corneum of participants obtained by tape stripping due to the phototype and age of the research participant. Participants were selected according to age above 18 years, both genders and skin phototype between I and VI, according to Fitzpatrick's classification. The SC samples were obtained from the volar forearm by tape stripping and artificially irradiated. High efficiency liquid chromatography (HPLC) was effective for the separation and proper quantification of the chemicals His, PCA and UCA isomers (trans-UCA and cis-UCA) in the stratum corneum of the participants. The method was selective and absent from interfering, in addition, it had linearity and limits of detection and quantification compatible with the objectives of this investigation. In phototype I, His levels were lower compared to the other groups. Moreover, the levels of this same substance showed no difference between age groups. Due to the irradiation of the samples, the amount of His increased in all phototypes. PCA levels were lower after irradiation in all skin phototypes. Furthermore, PCA concentrations were higher in the age group from 46 to 55 years of age. The concentration levels of the cis-UCA isomer were higher in participants with phototype III after UV irradiation. The concentration levels of the trans-UCA isomer decreased after irradiation, proportionally to the formation of cis-UCA in all phototypes. The age group 46-55 years of age obtained significantly lower levels of trans-UCA and cis-UCA